Protein ayrıştırma ve saflaştırma yöntemleri ile bu yöntemlerin temelindeki biyokimyasal prensipler düşünüldüğünde, aşağıdaki ifadelerden hangisi doğrudur?
- İzoelektrik odaklama (IEF) yönteminde proteinler, bir pH gradyanı boyunca net yüklerinin sıfır olduğu noktaya ulaşana kadar hareket ederler.Answer
- BJel filtrasyon kromatografisinde, moleküler ağırlığı büyük olan proteinler matriks gözeneklerine daha kolay girdiği için kolonu en son terk ederler.
- CSDS-PAGE analizinde proteinler, sadece yan zincirlerindeki amino asitlerin doğal (nativ) yük farklarına göre ayrışırlar.
- DBir proteinin izoelektrik noktasının (pI) altındaki bir pH değerinde, proteinin net yükü negatif olduğu için anyon değiştirici kolona bağlanması beklenir.
- E2-merkaptoetanol kullanımı, proteinlerin peptid bağlarını hidrolize ederek onları serbest amino asitlere parçalamak için tercih edilir.
Answer
İzoelektrik odaklama (IEF) yönteminde proteinlerin bir pH gradyanı boyunca net yüklerinin sıfır olduğu noktaya (pI) kadar göç etmesi doğru olan ifadedir.
İzoelektrik odaklama yönteminin temel prensibi, proteinlerin bir pH gradyanı içeren jel üzerinde, net elektrik yüklerinin sıfır olduğu izoelektrik nokta (pI) değerine karşılık gelen pH bölgesinde toplanmasıdır.
Step-by-Step Solution
Key Concept
Proteinlerin net yükü pH'a bağlıdır ve pI değerinde net yük sıfırdır; bu özellik proteinleri saflaştırmada (IEF) kullanılır.
Hints
1
İzoelektrik nokta (pI), bir proteinin net yükünün ne olduğuyla ilgilidir.
2
Jel filtrasyonda 'büyük olan önce çıkar' kuralını hatırlayın.
3
SDS-PAGE'de yük/kütle oranının sabitlendiğini ve ayrımın sadece kütleye göre yapıldığını düşünün.
Estimated Time:1m 30s